产品规格
| BFNC86061-01 | 10×100 μl | 保存：-80℃（3个月） |
| BFNC86061-02 | 50×100 μl | 保存：-80℃（3个月） |
| pYES2 (control vector, 10 ng/μl) | 10 μl | 保存：-80℃（12个月） |
| Carrier DNA (10 μg/μl) | 100 μl | 保存：-20℃（12个月） |
| PEG/LiAC: | 5 ml | 保存：4℃（12个月） |
基因型
产品说明
INVSc1菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母，pYES2质粒与INVSc1酵母配套使用，激活pYES2质粒的GAL1启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1为合子型，可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pYES2质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
操作方法
- 取100 µl冰上融化的INVSc1感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，Carrier DNA (95-100℃，5 min，快速冰浴，重复一次) 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀，30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
- 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
- 5000 rpm离心40 s弃上清，ddH2O 400 µl重悬，离心30 s弃上清。
- ddH2O 50 µl重悬，涂质粒筛选用：SD-U medium板，29℃培养48-96 h。
注意事项
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- INVSc1酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。